Como calcular meio de cultura: gramas por litro, volume por placa e quantos frascos comprar

Para calcular meio de cultura, comece pela ficha técnica: ela diz quantos gramas de pó vão em cada litro de meio. Divida a massa do frasco por essa proporção e você sabe quantos litros o frasco rende; divida esses litros pelo volume que vai em cada placa e você sabe quantas placas o frasco rende. Com as placas que você usa por mês, chega a quantos frascos comprar. No Ágar MacConkey, a ficha manda 49,53 g por litro: um frasco de 500 g rende cerca de 10,1 L de meio, e a 25 mL por placa de 90 mm isso dá perto de 400 placas.

O passo a passo do preparo (dissolução, esterilização, resfriamento e pH) está no guia como preparar meio de cultura desidratado. Aqui o assunto é só a conta.

Passo 1: o que a ficha diz (gramas por litro)

A proporção vem sempre da ficha técnica do produto, no campo de preparo ("suspender X g em 1000 mL"). Cada meio tem a sua, e não existe valor genérico que sirva para todos. Alguns exemplos do catálogo da Sora:

A mesma proporção diz quanto pesar quando você prepara um volume diferente de 1 litro:

pó (g) = volume de meio (L) × proporção (g/L)

Para 500 mL de Ágar MacConkey: 0,5 L × 49,53 g/L = 24,77 g. Para 750 mL de PCA: 0,75 × 23,5 = 17,63 g. Registre a massa realmente pesada: a ISO 11133 pede que o preparo seja documentado (lote, massa, volume, data), e esse registro também vira o histórico de consumo do laboratório.

Passo 2: quantos mL de ágar por placa de Petri

Não há um volume único: ele depende do diâmetro da placa, da técnica e do procedimento do laboratório. Para o cálculo, a Sora usa como premissa o volume necessário para uma camada de 4 mm de meio na placa. A conta é a área da placa, pelo diâmetro nominal, multiplicada por 0,4 cm:

A placa de Petri é um cilindro baixo, então o volume é o de um cilindro: volume = π × raio² × altura. Na placa de 90 mm:

1. Raio: metade do diâmetro, 45 mm, ou 4,5 cm.
2. Altura: a espessura da camada de meio, 4 mm, ou 0,4 cm.
3. Cálculo:

volume = π × raio² × altura

volume = 3,1416 × 4,5² × 0,4

volume ≈ 25,4 cm³

Como 1 cm³ = 1 mL, são 25,4 mL, arredondados para 25 mL.

Como o diâmetro interno real é um pouco menor que o nominal, a conta fica levemente a favor da folga.

Na prática, os volumes variam com a técnica e o método. Na semeadura em profundidade (pour plate), o volume é menor e vem definido no próprio método: a ISO 4833-1:2013 (contagem de microrganismos a 30 °C, item 9.2.5) manda verter cerca de 12 a 15 mL de ágar para contagem em placas, a 44–47 °C, em cada placa, e o capítulo 3 do FDA BAM (contagem de aeróbios em placa, edição de janeiro de 2026) indica 12 a 15 mL, resfriado a 45 ± 1 °C. A técnica está detalhada no guia de diluição seriada e contagem de colônias. Use o volume do seu POP ou do método que você segue; a camada de 4 mm é só a premissa da conta quando o método não define outro valor.

Passo 3: quantas placas rende um frasco de meio de cultura

Junte as duas contas:

• Volume rendido (L) = massa do frasco (g) ÷ proporção (g/L)
• Nº de placas = volume rendido (mL) ÷ mL por placa

Com o Ágar MacConkey: 500 g ÷ 49,53 g/L = 10,1 L. A 25 mL por placa de 90 mm, 10.095 mL ÷ 25 = 403 placas, ou cerca de 400. Na mesma premissa de 4 mm, o mesmo frasco rende:

O rendimento muda muito de um meio para outro. O PCA, a 23,5 g/L, rende 21,3 L por frasco de 500 g, mais que o dobro do MacConkey. Se o seu POP de contagem em profundidade usa, por exemplo, 15 mL por placa, esse frasco rende cerca de 1.400 placas. Mais sobre o meio em ágar PCA e contagem padrão em placas.

Passo 4: quantos frascos comprar para o consumo do laboratório

Com as placas por frasco do passo 3, a conta do estoque é curta:

1. Some as placas do mês para aquele meio, incluindo as de controle de qualidade: a placa sem inóculo que vai para a estufa como controle de esterilidade e as placas do teste de promoção de crescimento de cada lote preparado.
2. Multiplique pelos meses de estoque que você quer manter.
3. Divida pelas placas que um frasco rende, arredondando sempre para cima.

Exemplo com o Ágar MacConkey: 300 placas de 90 mm por mês × 3 meses = 900 placas; 900 ÷ 400 placas por frasco = 2,25, ou seja, três frascos de 500 g. Em pó, são cerca de 371 g por mês (7,5 L × 49,53 g/L).

Esse é o consumo teórico. No preparo há perdas: meio que fica na vidraria, evaporação durante a fervura, placas descartadas por contaminação, bolhas ou ressecamento. Não há um percentual de perda que valha para todo laboratório; o seu histórico de preparo é a melhor estimativa. Compre com folga, mas sem ultrapassar o que você consegue usar dentro da validade do pó, impressa no rótulo de cada lote, e respeitando a conservação da ficha (no Ágar MacConkey, pó entre 10 e 30 °C).

Se você planeja vários meios de uma vez, a Calculadora de meios de cultura da Sora faz essas quatro contas: você informa a placa usada, os meios, o consumo mensal em placas ou em litros e os meses de estoque, e ela mostra o rendimento por frasco e monta a lista de compras.

Casos especiais

Meios base com suplemento obrigatório

Em meios base, a proporção de pó vale para o volume final, já com o suplemento. A ficha do Ágar Base Baird-Parker, usado para estafilococos coagulase-positivos (como Staphylococcus aureus), manda suspender 63,0 g em 950 mL de água, esterilizar, resfriar a 50 °C e adicionar 50 mL de Emulsão de Gema de Ovo com Telurito: resultam 1.000 mL de meio completo. Portanto, por litro de placa pronta, são 63,0 g de base e 50 mL de emulsão.

Exemplo: 200 placas de 90 mm por mês × 25 mL = 5 L de meio completo, que pedem 5 × 63,0 = 315 g de base e 5 × 50 = 250 mL de emulsão. Como a emulsão vem em frascos de 100 mL, são 3 frascos no mês; cada frasco completa 2 L de meio (1.900 mL de base). O suplemento entra na lista de compras com a mesma prioridade do pó: sem ele, o meio não pode ser usado. A ficha do Baird-Parker também recomenda preparar as placas na hora, o que favorece lotes menores e mais frequentes. Veja os demais meios para Staphylococcus.

Caldos em tubos e concentração dupla (NMP)

Para tubos, troque "placas" por "tubos" na conta: volume (L) = nº de tubos × mL por tubo ÷ 1000. No método do número mais provável (NMP), atenção à concentração. A ficha do Caldo LST indica concentração simples (35,6 g/L) para inóculos de até 1 mL e concentração dupla ou proporcional para inóculos de 10 mL ou mais. Em concentração dupla, o caldo leva o dobro de pó: 71,2 g/L.

Exemplo: se o seu POP distribui 10 mL de caldo em concentração dupla por tubo, 50 tubos somam 0,5 L e pedem 0,5 × 71,2 = 35,6 g, a mesma massa que daria 1 L em concentração simples. Separe as duas séries no cálculo. O uso do LST na água está no guia de análise microbiológica da água.

Resumo das fórmulas

Todos os produtos do catálogo da Sora têm ficha técnica publicada com a proporção de preparo, os suplementos exigidos e a conservação. Para conferir a conta de vários meios de uma vez, use a Calculadora de meios de cultura; para dúvidas sobre preparo ou sobre o meio indicado para o seu método, fale com a equipe técnica da Sora.

Referências bibliográficas e normas técnicas